在正相色譜中，一般采用極性鍵合固定相，硅膠表面鍵合的是極性的有機(jī)基團(tuán)，鍵合相的名稱由鍵合上去的基團(tuán)而定。常用的有氰基(-CN)、氨基(-NH2)、二醇基(DIOL)鍵合相。流動(dòng)相一般用比鍵合相極性小的非極性或弱極性有機(jī)溶劑，如烴類溶劑，或其中加入一定量的極性溶劑(如氯仿、醇、乙腈等)，以調(diào)節(jié)流動(dòng)相的洗脫強(qiáng)度。通常用于分離極性化合物。一般認(rèn)為正相色譜的分離機(jī)制屬于分配色譜。組分的分配比K值，隨其極性的增加而增大，但隨流動(dòng)相中極性調(diào)節(jié)劑的極性增大(或濃度增大)而降低。同時(shí)，極性鍵...

溶劑混合時(shí)氣泡的形成會(huì)導(dǎo)致液相色譜分析中的許多問(wèn)題，這些問(wèn)題可以通過(guò)對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行脫氣來(lái)避免。當(dāng)溶劑混合時(shí)，空氣的溶解度低于同比例的純?nèi)軇?，過(guò)量的空氣會(huì)從溶液中析出/冒泡。脫氣是用來(lái)描述溶解氣體從溶液中出來(lái)的術(shù)語(yǔ)。這種現(xiàn)象也可能發(fā)生在HPLC系統(tǒng)中，其中粗糙的表面會(huì)產(chǎn)生氣泡形成的成核位點(diǎn)。由于產(chǎn)生死體積，氣泡還可以改變流動(dòng)相通過(guò)色譜柱的流量。在HPLC分析中，通過(guò)對(duì)流動(dòng)相脫氣，可以在很大程度上避免因氣泡形成而產(chǎn)生的問(wèn)題。一、HPLC系統(tǒng)中的除氣1.低壓混合：低壓混合系統(tǒng)更容易形...

在日常分離分析工作中，高效液相色譜柱的使用和維護(hù)十分重要，色譜柱使用是否得當(dāng)，直接影響色譜柱的壽命，稍有不慎就會(huì)降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過(guò)程中，需要注意下列問(wèn)題，以維護(hù)色譜柱。高效液相色譜柱的正確使用：（1）柱子在裝卸、更換時(shí)，動(dòng)作要輕，接頭擰緊要適度。必須防止較強(qiáng)的機(jī)械振動(dòng)，以免柱床產(chǎn)生空隙。（2）如果儀器用來(lái)做常規(guī)分析，樣品種類有限，但分析次數(shù)多，則不妨為每一類常規(guī)分析配置一根專用柱，這樣有助于延長(zhǎng)柱子的壽命。（3）避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng)...

高效液相色譜系統(tǒng)(HPLC)是指分析化學(xué)中的一種技術(shù),用于識(shí)別、分離和量化混合物中的每種成分。C8和C18均指色譜柱鍵合面的烷基鏈，都用于高效液相色譜系統(tǒng)。一、什么是C18：C18柱、C8柱和C4柱都是直鏈烷基硅烷相。C18是辛基癸基硅烷，含有18個(gè)與二氧化硅結(jié)合的碳。因此C18比C8（8個(gè)碳）或C4（4個(gè)碳）具有更多的碳和更長(zhǎng)的碳鏈。由于額外的碳，C18具有更大的表面積，流動(dòng)相必須穿過(guò)。這在鍵合相和洗脫物之間提供了更多的相互作用時(shí)間。因此，樣品洗脫得更慢，分離度更高。C18...

一、HPLC色譜柱的安裝：首先檢查色譜柱與儀器的連接和管道是否匹配。使用色譜柱測(cè)試程序中建議的過(guò)濾和脫氣流動(dòng)相沖洗您的HPLC泵和管路。確保系統(tǒng)中沒有氣泡。將流速設(shè)置為0.1mL/min并連接到色譜柱入口，確保流速沿色譜柱上箭頭指示的方向。擰緊進(jìn)入色譜柱的末端接頭，將流速增加到1mL/min（僅適用于4.6mmID色譜柱）持續(xù)5分鐘。在連接到流通池之前，停止流動(dòng)并擦拭色譜柱的出口端以去除其他任何的顆粒。將色譜柱出口連接到流通池，以1mL/min的速度將大約10個(gè)色譜柱體積通過(guò)...

液相色譜儀的預(yù)柱是針對(duì)流動(dòng)相來(lái)保護(hù)色譜柱，保護(hù)柱是針對(duì)樣品來(lái)保護(hù)色譜柱。一、安裝位置不同：1、預(yù)柱：在泵后進(jìn)樣口前，途經(jīng)流動(dòng)相。2、保護(hù)柱：在進(jìn)樣口后分析柱前，途經(jīng)樣品和流動(dòng)相。二、作用不同：1、預(yù)柱：預(yù)柱只起過(guò)濾顆粒物的作用，防止顆粒物堵塞色譜柱篩板引起柱壓升高。2、保護(hù)柱：保護(hù)柱除了可以過(guò)濾顆粒物外，因?yàn)閹?cm長(zhǎng)的填料(保護(hù)柱的填料與分析柱一樣，但粒徑要大的多，這樣便于裝填)，強(qiáng)保留物質(zhì)就先留在保護(hù)柱的填料中，可以避免色譜柱被強(qiáng)保留物質(zhì)污染。