ODS填料的粒度主要影響填充柱的兩個(gè)參數(shù)，即柱效和背壓。粒度越小，其表面積越大，填充柱的柱效超高；然而粒度越小，柱壓越大，柱壓的增加限制了粒度小于3pm的ODS填料應(yīng)用。在相同選擇性條件下，提高柱效可提高分離度，但不是因素。如果固定相選擇是正確，但是分離度不夠，那么選用更小粒度的ODS填料是很有用的。3umODS填料填充柱的柱效比相同條件下的5pmODS填料的柱效提高近30%；然而，3um的色譜柱的背壓卻是5um的2倍。與此同時(shí)，柱效提高意味著在相同條件下可以選用更短的色譜柱...

高效液相色譜是一種廣泛使用的分析分離技術(shù)，用于定量、鑒定和分離非揮發(fā)性液體混合物的成分。HPLC色譜柱里面有各種孔徑的“填料”，稱為“固定相”。經(jīng)過孔的樣品被稱為“流動(dòng)相”。當(dāng)流動(dòng)相到達(dá)固定相時(shí)，大分子會(huì)被較小的孔截?cái)r，從而使較小的分子可以更快更好地洗脫，這就是分離過程。這導(dǎo)致較小分子具有更快的保留時(shí)間，分子在色譜柱中停留的時(shí)間越長(zhǎng)，色譜圖上的峰越寬。溶劑過濾器是化學(xué)實(shí)驗(yàn)室常用的裝置，主要應(yīng)用于高效液相色譜流動(dòng)相過濾、粒子物質(zhì)分析和微生物污染檢測(cè)等，也是化學(xué)實(shí)驗(yàn)室常備器材。恒...

反相色譜是迄今在高效液相色譜中應(yīng)用較廣泛的技術(shù)，主要是因?yàn)樗m用于分析極大多數(shù)的非極性物質(zhì)和很多的可離子化的及離子化合物。大多數(shù)用于反相色譜的固定相都是天然的疏水物質(zhì)，因此，分析物是按照它們與固定相的疏水相互作用的大小來分離的，含有疏水的機(jī)制也能以同樣的保留方式分離。反相色譜柱利用各種流動(dòng)相和添加物可以有很多的應(yīng)用，一些技術(shù)利用添加物可以改變或修飾填料的表面，有時(shí)候這些添加物有可能會(huì)污染鍵合相表面。硅膠表面因?yàn)橛兄杷I合相而有一些別的化學(xué)性質(zhì)，殘留的硅烷醇存在于所有的硅膠鍵...

一、導(dǎo)致高基線和變化基線的流動(dòng)相雜質(zhì)：雜質(zhì)在流動(dòng)相中高度溶解的特定情況下，它們不會(huì)被色譜柱截留，并有助于在整個(gè)色譜圖中產(chǎn)生高于正常的檢測(cè)器信號(hào)。使用梯度洗脫時(shí)，如果雜質(zhì)僅存在于梯度中使用的一種溶劑中，則檢測(cè)器信號(hào)可能會(huì)緩慢變化并且與在任何時(shí)間點(diǎn)對(duì)流動(dòng)相有貢獻(xiàn)的溶劑比例有關(guān)。流動(dòng)相雜質(zhì)不會(huì)表現(xiàn)為看起來像典型色譜峰的信號(hào)特征，因此它們不會(huì)直接與分析物峰本身發(fā)生沖突。但是如果雜質(zhì)的物理化學(xué)性質(zhì)與分離中的目標(biāo)分析物相似，則雜質(zhì)可以表現(xiàn)為基線中看起來像典型峰的特征。有時(shí)這些被稱為“鬼峰...

一：色譜柱的問題色譜柱會(huì)因不同的品牌都會(huì)有對(duì)應(yīng)的清洗要求，可以查找色譜柱的說明書或者查找資料和請(qǐng)教有經(jīng)驗(yàn)的色譜工作者進(jìn)行操作，否則盲目操作有可能會(huì)造成色譜柱效下降和色譜柱的使用壽命縮短。如果發(fā)現(xiàn)柱內(nèi)條件變化了，需要穩(wěn)定進(jìn)樣條件,調(diào)節(jié)流動(dòng)相。不少做色譜實(shí)驗(yàn)的技術(shù)人員平時(shí)可能也會(huì)碰上這樣的一個(gè)問題：如果不及時(shí)補(bǔ)充流動(dòng)相，泵會(huì)將溶劑瓶中的流動(dòng)相吸干了會(huì)不會(huì)影響色譜柱呢？答案是不會(huì)的！因?yàn)楸美锩娉錆M了空氣，但是泵也不會(huì)將空氣排入色譜柱的，泵只傳送液體不傳送空氣。恒譜生液相色譜柱采用不...

c18反相色譜柱是指利用非極性的反相介質(zhì)為固定相，極性有機(jī)溶劑的水溶液為流動(dòng)相，根據(jù)溶質(zhì)極性(疏水性)的差別進(jìn)行溶質(zhì)分離與純化的洗脫色譜法。與HIC一樣，RPC中溶質(zhì)也通過疏水性相互作用分配于固定相表面，但是，RPC固定相表面*被非極性基團(tuán)所覆蓋，表現(xiàn)出強(qiáng)烈的疏水性。因此，必須用極性有機(jī)溶劑(如甲醇、乙腈等)或其水溶液進(jìn)行溶質(zhì)的洗脫分離。c18反相色譜柱在使用前，最好進(jìn)行柱的性能測(cè)試，并將結(jié)果保存起來，作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。在做柱性能測(cè)試時(shí)要按照C4反相色譜柱出廠報(bào)告...